慢性B型肝炎病毒感染是全球很重要的公衛課題。世界上已有二十億人感染了B肝
病毒,其中有超過三億人演變為慢性肝炎。B肝病毒感染導致每年因慢性肝炎,肝
硬化,和肝癌引發之百萬人死亡,並且是全球十大主要死亡原因之一,尤以B肝盛
行國家如亞洲及非洲國家為甚。因此有效地監控B肝病毒治療效果是評估治療方向
很重要的依據,也是防止肝癌發生最佳策略。目前廣泛使用的抗B肝病毒療法是以
核酸類似物(nucleoside/nucleotide analogs)為主體之藥物治療。此類藥物
抑制病毒基因的反轉錄過程,使得病毒複製及肝發炎得到有效控制,即為所謂
“病毒抑制“ (viral suppression)。然而,它們無法根除病毒之covalently clos
ed circular (ccc) DNA及其轉錄產物pre-genomic (pg) RNA,因此在抗病毒治
療停止後復發風險很高,亦即“病毒”或“功能性”治愈(virological/functiona
l cure)成功率低。因此,cccDNA被認為是治療後病毒再活化(viral reactivation)
的重要預測生物標誌。由於cccDNA濃度在細胞中非常低(2-30拷貝/細胞),且
它與細胞中大量的rcDNA共同存在,因此不易被特異得檢出。本研究團隊致力於
發展高靈敏度分子檢測技術,建立兼具高敏感度與高特異性之分子定量方法,精
準追蹤B肝病人治療療效。我們以高敏感度數位PCR技術進行HBV DNA載量與cc
cDNA之同步定量檢測,以評估抗病毒藥物治療後之病毒載量及cccDNA 濃度作
為肝炎復發和 HCC 的預測生物指標,並進行專利智財保護及LDTS檢測建立。成
果如下:
1. 完成開發肝臟組織和血清cccDNA純化流程,建立T5與T7核酸外切脢單管反
應,降低殘留rcDNA干擾,優化操作流程。
2. 完成開發數位PCR系統進行B肝病毒DNA定量,有效提高B肝病毒檢測敏感度。
3. 完成開發HBV 病毒載量與 cccDNA 之dPCR 同步定量測試之LDTS檢驗套組,
並完成美國暫時專利申請。
4. 與成大醫院共同進行臨床檢測,完成臨床檢體測試分析,篩檢出低濃度B肝陽
性帶原者。持續進行大規模臨床篩檢低濃度B肝帶原者,應用於B肝治療策略評
估。